研究表明，在原料中水分含量較高的情況下，雙乙酸鈉可進入霉菌細胞內，通過對酶活性的破壞而使霉菌死亡。該結果與閆革華等報道基本一致，其發(fā)現(xiàn)雙乙酸鈉對生鮮牛奶的防霉效果要優(yōu)于其他防霉劑。丙酸鈣已廣泛用于飼料防霉劑，在本研究中所用的四種防霉劑中，其抑菌譜最廣，對大部分真菌和少部分細菌都有很好的抑制作用。洪亦武等的研究表明，丙酸鈣對酵母菌、黑曲霉菌、灰綠曲霉菌和煙曲霉均等十幾種霉菌都有較好的抑制作用。山梨酸鉀在水中溶解度較低，因而可能在發(fā)酵飼料中難以發(fā)揮更好的防霉作用; 檸檬酸發(fā)揮防霉抑菌作用主要是依靠降低環(huán)境pH 來實現(xiàn)，由于本試驗所用發(fā)酵飼料的pH 較低，所以檸檬酸難以發(fā)揮其酸性防霉效應。試驗結果表明， 添加量為0. 30% 的雙乙酸鈉和2. 00%的丙酸鈣防霉效果最佳，其原因可能與幾種防霉劑的作用機制不同有關。

本試驗中，乳酸濃度在第0 至第1 天時有緩慢增長，這可能是由于發(fā)酵飼料中仍有部分乳酸菌產生少量乳酸。隨著試驗時間繼續(xù)延長，乳酸菌的大量死亡，在第2 天時乳酸含量開始緩慢下降。在保存至第4 天時，雙乙酸鈉組乳酸含量顯著高于丙酸鈣組和對照組，暗示雙乙酸鈉組中的酸性物質減少量少于丙酸鈣組和對照組，這可能與雙乙酸鈉的防霉機理有關。雙乙酸鈉主要依靠游離出的乙酸分子破壞細胞內的酶系統(tǒng)來抑制微生物的活性，游離的乙酸也可以有效降低飼料的pH，這與雙乙酸鈉組的pH 值一直低于其他兩組吻合。在本試驗中，固態(tài)發(fā)酵飼料的pH 在發(fā)酵結束后的第2 天開始緩慢升高，并在第10 天達到7 左右，這意味著發(fā)酵飼料中的乳酸和揮發(fā)性脂肪酸等酸性物質已經幾乎消耗殆盡，這一結果與Wang等研究結果相一致。Missotten 等的研究表明，乳酸菌發(fā)酵液體飼料的pH 會在達到穩(wěn)定之后緩慢上升，這是由于飼料中菌體的大量死亡裂解，釋放了大量的菌體蛋白，并且飼料中的某些微生物開始利用有機酸和菌體蛋白產生大量含有堿基的代謝產物，這些物質會導致pH 的上升。

黃通旺研究表明，在普通飼料中添加0. 1%的雙乙酸鈉可有效抑制飼料中霉菌的生長，且作用時間可以持續(xù)40 天左右。在本試驗中，雙乙酸鈉和丙酸鈣均可以有效抑制霉菌至第4 天，至第6 天以后飼料中霉菌數(shù)量超出限量標準，而對照組的霉菌數(shù)量在第3 天就已經超出限量標準。與黃通旺研究結果不一致的原因可能是飼料性質不同、保存條件不同，發(fā)酵飼料由于水分含量高，并且在本試驗中暴露于空氣中，霉菌更容易大量生長; 而石傳林等在用雙乙酸鈉作為青貯飼料防霉劑時發(fā)現(xiàn)，添加雙乙酸鈉的青貯玉米秸質地松軟，顏色黃綠、腐爛少，霉菌計數(shù)結果顯示比對照組顯著降低，這與本試驗結果相一致。

考慮到發(fā)酵飼料的主要活性功能物質包括乳酸菌等活菌制劑及微生物代謝產物，因此，本實驗同時研究了防霉劑對發(fā)酵飼料中乳酸菌數(shù)量的影響，據(jù)Heres 等報道，在不經過特殊處理條件下，乳酸菌液態(tài)發(fā)酵飼料中乳酸菌的數(shù)量在發(fā)酵結束后5 d 內開始大量死亡; Hansen 等也發(fā)現(xiàn)，在液體發(fā)酵飼料中乳酸菌的對數(shù)生長期出現(xiàn)在12 ～ 24 h，在進入穩(wěn)定期后24 h 菌體開始裂解并釋放大量菌體蛋白。在本試驗中，添加雙乙酸鈉和丙酸鈣以及對照組的發(fā)酵飼料中乳酸菌數(shù)量總體都呈明顯下降趨勢，與前人的研究結果一致。而丙酸鈣的抑菌作用相對較強，乳酸菌的繁殖在本試驗的開始即受到抑制，從這一點來看，雙乙酸鈉的防霉效果要優(yōu)于丙酸鈣。試驗同時發(fā)現(xiàn)，隨著保存時間的延長，添加雙乙酸鈉和丙酸鈣的兩組發(fā)酵飼料中乳酸菌的數(shù)量明顯高于對照組，可能是兩種防霉劑抑制了霉菌的大量增殖，飼料中的營養(yǎng)物質依然可以被乳酸菌利用進而生長，而對照組中，乳酸菌數(shù)量呈明顯下降趨勢，說明霉菌在大量繁殖的過程中可能競爭性的抑制乳酸菌的生長。